CAS No.: | 39450-01-6 |
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Formula: | C29h27n2o12p |
EINECS: | 254-457-8 |
Specific Usage: | For Biological Purpose, For Microbiological, Nucleic Acid Extraction, Circulating DNA Extractio |
Content: | 95% (SDS-Page Analysis) |
Usage: | Laboratory Reagents, Analytical Reagents, Diagnostic Reagents, Teaching Reagents, Plasmid or Genomic DNA, Rna Separation and Extract |
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Protéinase K (lyophilisat, Ultra Pure)
N° CAT | NOM DU PRODUIT | TAILLE | PRIX |
C12100 | Protéinase K (lyophilisat, Ultra Pure) | 1 g | 312.00 $ |
C12101 | Protéinase K (lyophilisat, Ultra Pure) | 10 g | 2,602.00 $ |
C12102 | Protéinase K (lyophilisat, Ultra Pure) | 100 g | 23,410.00 $ |
PDB-1000 | PDB tampon | 1000 ml | 300.00 $ |
△ Introduction
La protéinase K est une sérine protéase stable avec une large spécificité de substrat. Il dégrade de nombreuses protéines à l'état natif, même en présence de détergents. Il n'est pas activé par des métaux, des agents chélateurs (par exemple, EDTA), des réactifs sulfhydryles ou par des inhibiteurs de la tripsinor chymotrypsine. Il est stable sur une large plage de pH (4-12.5), avec une activité optimale à pH 6.5-9.5. L'activité peut être stimulée par l'ajout d'agents dénaturants (SDS et urée). La dénaturation rapide de l'enzyme se produit à une température supérieure à 70°C. L'autolyse de l'enzyme se produit de plus en plus à pH alcalin.
Toutefois, la protéinase K n'est pas complètement inactivée par autolyse. Certains fragments d'enzymes continuent à maintenir leur activité protéolytique complète, même après une autolyse poussée.
La protéinase K est fréquemment utilisée dans les applications de biologie moléculaire pour digérer les protéines indésirables, telles que les nucléases dans les préparations d'ADN ou d'ARN à partir de micro-organismes, de cellules cultivées et de plantes. L'enzyme est généralement utilisée à 50-200 μg/ml dans des préparations d'acides nucléiques à pH 7.5-8.0 et 37-55°C. Les temps d'incubation varient de 30 minutes à 18 heures.
△ spécifications
Fonctionnalités | Caractéristiques techniques |
Poids moléculaire | 29,3 kDa |
Point isoélectrique | 8.9 |
Apparence | Poudre lyophilisée blanche |
Pureté | 95 % (analyse SDS-PAGE) |
Activité spécifique | ≥ 30 unités/mg de protéine |
Caractéristique de température | La température d'activité effective est de 37 à 70 °C, et l'activité enzymatique à 65 °C est deux fois plus élevée qu'à 25 °C. |
Caractéristiques DU PH | 4.0-12.0, la plage optimale est ph7.5-11.5 |
Conditions de conservation |
Il est recommandé de conserver à -20°C pour assurer la stabilité de l'activité dans toute la mesure (le transport ou le stockage à température normale ne réduira pas l'activité enzymatique). La durée de conservation est de 3 ans à -20°C et de 2 ans à 2-8°C. |
Méthode d'utilisation |
Préparer 20 mg/ml avec la solution, ajouter la protéinase K à la solution digestive ou au lysat jusqu'à ce que la concentration finale soit de 50 à 200 μg/ml, et incuber à 55-70°C. La protéinase K après réaction peut être retirée ou inactivée par la méthode des billes magnétiques, la méthode des colonnes ou l'extraction de la forme phe nol chloro. La protéase K peut être inactivée par incubation à 95°C pendant 3 minutes ou à 70°C pendant 15 minutes. |
Détection des résidus d'acides nucléiques |
Qubit n'a pas détecté Contamination de l'ADN humain non détectée (PCR en temps réel) Note : la protéase 1G K est utilisée pour l'acidoextraction nucléique et éluée par un tampon d'élution de 40 μl. |
Détection de nucléase |
DNase non détecté RNase non détectée |
Application recommandée | Extraction d'acides nucléiques, extraction d'acides nucléiques de virus |
△ avantages
Contenu | C12100 | C12101 | C12102 | PDB-1000 |
Protéinase K, lyophilisat, > 30 unités/mg de protéine | 1 g | 10 g | 100 g | |
Tampon PDB (Tris de 20 mm, pH 7.5, CaCl2 de 10 mm, glycérol à 50 %, conservateurs à 0.1 %) | 1000 ml |
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