| Le regroupement |
Antibiotiques |
| Mots-clés |
L'hygromycine B |
| Image de marque |
NJDULY |
| Modèle |
Un0026 |
| Lieu d'origine |
Nanjing, Chine (continentale) |
| Le paiement |
T/T |
| Le port |
Shanghai |
| Capacité d'alimentation |
100 pièces/pièces par mois |
| L'emballage |
100 mg/pièce |
| Autres emballages |
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L'hygromycine B
CAS:31282-04-9
Formule moléculaire : C20H37N3O13
Poids moléculaire : 527.52
Pureté : > 90 %
Les propriétés chimiques : poudre blanche à pratiquement blanche, facilement soluble dans l'eau, du méthanol et éthanol.
Objet : recherche biochimique
Mécanisme d'action : l'hygromycine B est un aminoside antibiotique produit par Streptomyces hygroscopicus métabolisme. Il tue les bactéries, champignons et de la hausse des cellules eucaryotes en inhibant la synthèse protéique. L'hygromycine B inhibe la synthèse des protéines en interférant avec la translocation ribosomique 70s et de l'induction de mauvaise interprétation de l'ARNM modèle. À présent, il est souvent utilisé pour l'écran et de maintenir l'procaryotiques ou les cellules eucaryotes avec l'hygromycine gène de résistance.
Le gène de résistance :
La résistance à l'hygromycine B vient de le gène codant pour l'hygromycine B phosphotransférase (HPH). Jusqu'ici, deux sources ont été trouvés :
HPH le gène de résistance produit par Streptomyces hygroscopicus;
HPH le gène de résistance transportées par le réticulum des granulés d'Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae (couramment utilisé);
Des applications biologiques :
1) le dépistage et le maintien de la culture de cellules procaryotes ou les cellules eucaryotes (cellules végétales et des cellules de mammifères) de manière stable transfectées avec HPH + vecteur;
2) En raison de la différence de mode d'action, il est souvent comparé avec le G418 (geneticintm) et zeocin ™ combiné avec blasticidine S, les lignées cellulaires transfectées de façon stable avec deux différents scénarios ont été examinés;
| Mécanisme et la résistance d'antibiotiques dans le dépistage des cellules transfectées stables double résistant |
| Antibiotique |
Mécanisme de résistance |
Le gène de résistance |
La concentration de dépistage chez les mammifères |
| L'hygromycine B |
Interférence avec une translocation ribosomique 70s et de l'induction de mauvaise interprétation de l'ARNM modèle |
Hph |
200~500μg/mL |
| G418 |
Interférer avec la fonction ribosomique 80s et en inhibant la synthèse des protéines |
Tn5/Tn601 |
100~1000μg/mL |
| Zeocin |
L'incorporation ou de l'ADN de clivage provoque la mort cellulaire |
Sh ble |
50~100μg/mL |
| Blasticidine S |
L'inhibition de la formation de liaisons peptidiques sur les ribosomes |
Bsd/BSD |
3~50μg/mL |
3) agent antiviral, l'hygromycine B pénètre de façon sélective dans les cellules avec le renforcement de la perméabilité à cause de l'infection virale, et a pour effet de l'inhibition de la traduction;
4) Ajoutez l'alimentation animale comme insectifuge;
La concentration d'application :
Le groupe de travail de la concentration de l'hygromycine B utilisé à l'écran stable souches transgéniques doit changer selon le type de cellules, milieu de culture, conditions de croissance et le taux de métabolisme cellulaire. La concentration recommandée est 50-1000 μ g / ml, la concentration optimale doit être déterminée par le meurtre de courbe.
Les cellules de mammifères · 200-500 μ g/mL; les bactéries / les cellules végétales · 100-300 μ g/mL ; Les champignons · 300-1000 μ g/mL ;
Utilisation du produit :
Utiliser 1 : Courbe de tuer pour déterminer la meilleure tuer concentration (pour référence seulement, elle varie selon le système de détection individuels)
(1) les cellules non transfectées ont été ajoutés à plaques 96 puits de la culture de tissus grade, avec une densité de cellules d'environ 50-200 cellules / bien ; après la cellule est conforme à la paroi, différentes concentrations (p. ex. 50-1000) sont ajoutés à chaque puits μ g / ml, au moins 5 concentrations) 200 % de l'hygromycine B μ l milieu frais ;
(2) Les cellules sont incubées dans 5 % de CO2 L'incubateur à 37 ºC pendant 10-14 jours;
(3) après 5 à 7 jours à compter de la culture, de le remplacer par un nouveau milieu de culture, qui contient l'hygromycine B de la concentration correspondante ;
(4) après 10-14 jours, la prolifération cellulaire des méthodes telles que MTT et de la CCK-8 ont été utilisés pour évaluer la viabilité cellulaire; les effets toxiques peuvent également être déterminé par la détection de la nombre de clones de cellules ou en pourcentage de la confluence. En règle générale, la concentration minimale qui peut tuer toutes les cellules de 10-14 jours est le meilleur de la concentration de dépistage.
Utiliser 2 : les cellules transfectées stables de l'écran
(1) pour cellules adhérentes, directement sucer le milieu de culture de cellules transfectées dans la culture de 60mm plat, et ensuite ajouter 5-6ml de milieu de culture frais contenant de l'hygromycine B; pour les cellules en suspension, l'état stérile a été 250xg, centrifugé pour 10min à retirer l'ancienne culture de cellules transfectées moyenne, puis en suspension dans environ 5 ml de milieu frais contenant de l'hygromycine B;
(2) après 5 à 7 jours, remplacer le milieu frais contenant l'hygromycine B comme ci-dessus ;
(3) Les cellules sont incubées pendant 5 à 7 jours ;
(4) après 10-14 jours d'incubation, le système de culture ne contenait que les cellules vivantes qui pourraient exprimer l'hygromycine B du phénotype de résistance. Par conséquent, après le dépistage, remplacer le milieu frais sans l'hygromycine B comme à l'étape 1.
Informations de la société
Nanjing dûment Biotech Co.,Ltd
A été établi pour 11 ans. Il est principalement engaded dans les réactifs chimiques et biologiques, y compris les réactifs de l'enzyme, protéines, acides nucléiques, de pigments, les acides aminés, vitamines,les hydrates de carbone, tampons, les surfactants, des milieux de culture et de la séparation des matériaux et des kits.Il y a plus de 10.000 produits au total.
Notre entreprise a pour but de fournir aux clients la meilleure qualité de produits et les plus intimes service.Personnel a été formés ; chaque lot de matières est cochée ; chaque procédure garantit la qualité; chaque sac de nos produits est top grade;service est attentionné tout le temps.La qualité, couleurs et formes de nos produits ont atteint un niveau élevé dans l'industrie chimique, qui repose sur la caractéristique de la technologie de traitement avancées et et il a acquis une réputation de haute et fiable des clients tant au niveau de qualité et de services.
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