1. Le kit est placé à température ambiante pendant 30 minutes. La lotion concentrée 20 fois est diluée 20 fois avec
eau désionisée ou distillée.
2. Ajouter 100 μl de diluant d'échantillon et 5 μl d'échantillon dans chaque puits des puits de test, mélanger délicatement ; un puits de blanc
référence sans liquide; deux puits de référence positive et négative, ajouter le sérum de référence positif et négatif
Sérum de référence, respectivement 100 μl/puits. Après avoir fixé le film d'étanchéité, placer la boîte dans un bain-Marie à 37 °C ou un
incubateur à température constante et incuber pendant 30 minutes.
3. Jetez le film d'étanchéité et lavez la plaque avec un lave-vaisselle ou à la main, de sorte que chaque puits soit rempli de
Le liquide de lavage sans débordement (environ 300 μl), le temps de trempage est de 10 secondes, la plaque est lavée 5 fois,
et enfin, dans du papier absorbant, sécher.
4. Ajouter 100 μl de solution de référence enzymatique dans chaque puits (sauf les puits vides), après fixation du joint
Placez la boîte dans un bain-Marie à 37 °C ou dans un incubateur à température constante et laissez incuber pendant 30 minutes.
5. Comme dans la procédure ci-dessus 3, laver la plaque et la sécher.
6. Ajouter 50 μl de solution de substrat et de solution de coloration dans chaque puits, agiter doucement et bien mélanger. Après
Fixer le film d'étanchéité, placer la boîte dans un bain-Marie à 37 °C ou dans un incubateur à température constante, et laisser incuber pendant 10
minutes dans l'obscurité.
7. Jetez le film d'étanchéité, ajoutez 50 μl de solution d'arrêt dans chaque puits, secouez-le doucement pour mélanger, mesurez la valeur de DO avec un
lecteur de microplaques à une longueur d'onde de 450 nm (réglage à zéro avec les puits vides) et impression des résultats.
Résultats :
1. Valeur DO de l'échantillon ≥ valeur seuil, jugée positive, valeur DO de l'échantillon < valeur seuil, jugée négative.2. Coupure=3.1×valeur moyenne de DO de référence négative (lorsque la valeur moyenne de DO négative est < 0.05, elle est de
Calculé comme 0.05 ; lorsque la valeur moyenne de DO négative est ≥ 0.05, elle est calculée comme la valeur réelle).
3. Dans des circonstances normales, le négatif < 0.10, le positif ≥ 1.0.
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