1. Laisser le kit à température ambiante pendant plus de 30 minutes avant l'utilisation et de revenir à température ambiante
(20-25°C).
2. Prendre la quantité requise d'ELISA de lamelles en bois, de configurer 1 puits pour le vide et 2 puits pour le négatif/positif
Séparément, le joint la partie inutilisée de lamelles en bois dès que possible et de stocker à 2~8ºC.
3. Ajouter 100 μL de l'échantillon solution diluée à l'puits vide; Ajouter 100 μL de l'négatif et positif
Solution de référence pour les puits de négatifs et positifs respectivement; Ajouter 100 μL de l'échantillon dilué à chaque
De l'échantillon bien.
4. Bien mélanger, couvercle de la membrane, et le lieu à 37ºC (recommandé bain d'eau) dans l'obscurité pendant 30 minutes.
5. Secouer le liquide dans le puits, ajouter 350 μ L de liquide de lavage de travail à chaque puits, laisser reposer pendant 30
Secondes et le mettre au rebut, répéter 5 fois de lavage, et enfin pat sec avec du papier absorbant propre.
6. Ajouter 100 μL d'enzyme marqueur pour chaque bien (sauf puits vide). Couvrir le couvercle du film, fixé à 37°C, et
Éviter de lumière pour 30 minutes.
7. Laver, de même que l'étape 5.
8. Ajouter 50 μL de solution de substrat et solution de coloration à chaque puits en séquence, mélanger, couvrir la plaque de couvercle
Film, fixé à 37 °C et d'éviter la lumière pendant 10 minutes.
9. Ajouter 50 μL de solution d'arrêt à chaque puits, mélanger et mesurer l'absorbance (OD) de la valeur de chaque bien à la
450Nm (630nm peuvent être utilisés comme la longueur d'onde de référence). Si il y a pas de longueur d'onde de référence, utilisez un blanc
Bien au réglage du zéro (l'absorbance de tous les puits moins l'absorbance de vide).
1. L'échantillon OD valeur ≥ 0,38 est positif ; l'échantillon OD valeur comprise entre 0,2 et 0,38 est suspecte ; le
Diamètre extérieur de l'échantillon valeur <0,2 est négatif.
2. Lorsque le résultat est négatif ou suspecte, il indique que le niveau d'anticorps du porc est insuffisant, et
Il est recommandé de vacciner en conséquence.
3. Dans des conditions normales, le négatif et la borne positive de ≤0,10 ≥0,6.